BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞

產品描述

BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞是大腸桿菌BL21(DE3)pLysS經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。該菌株攜帶pLysS質粒，具有氯霉素抗性（Cam^r），PLysS含有表達T7溶菌酶的基因，能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾目的蛋白的表達。

本品適合毒性蛋白和非毒性蛋白的表達。使用pUC19質粒檢測，本品轉化效率可達10⁷。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞

基因型：F- ompT hsdSB(rB - mB -) gal dcm(DE3)pLysS Camr。

運輸和保存方法

干冰運輸。

BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞于-80℃保存，pUC19質粒≤-20℃保存。有效期半年。不可于液氮中保存！

注意事項

1）感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用。

BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞2）待轉化DNA加入體積不要超過感受態細胞體積的1/10。

3）待轉化DNA加入感受態細胞后，請勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。

4）為確保*高效率轉化，整個操作過程應盡量輕柔，并保持低溫。

5）本品應于-80℃保存，請勿將感受態細胞儲存于-20℃或液氮中保存。

6）為了您的**和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1）將感受態細胞從-80℃中取出，置于冰水浴中融化。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞

2）將待轉化DNA加入到100 μl感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30分鐘。

3）42℃水浴，不要晃動，準確熱激90s后，立刻置于冰水浴中，靜置2-3分鐘。

4）向離心管中加入900 μl LB或SOC培養基，37℃水浴鍋中靜置10分鐘。

5）150 rpm, 37℃振蕩培養45分鐘，使菌體復蘇，抗性基因表達。

6）2,500 g離心5分鐘，去掉900 μl上清。用剩余培養基將菌體重懸，用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培養過夜。

【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之內都可重新涂板。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞