pET44系列載體是設(shè)計(jì)用來(lái)克隆和高水平表達(dá)含有495個(gè)氨基酸的Nus標(biāo)簽的蛋白表達(dá)載體。與pET-43.1系列載體相比，pET44系列載體額外編碼一個(gè)N端的His蛋白純化標(biāo)簽。
pET42a載體的單一的多克隆位點(diǎn)見(jiàn)上面的環(huán)狀質(zhì)粒圖譜。注意：載體序列是以pBR322質(zhì)粒的編碼規(guī)矩進(jìn)行編碼的，所以T7蛋白表達(dá)區(qū)在質(zhì)粒圖譜上面 是反向的。T7 RNA聚合酶啟動(dòng)的克隆和表達(dá)區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標(biāo)注了出來(lái)。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的，所以在T7噬菌體聚合酶的作用下，包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生，并啟動(dòng)蛋白表達(dá)，同時(shí)蛋白表達(dá)將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。對(duì)pET44a載體的單鏈測(cè)序可以使用COLIDOWN primer(Cat. No. 70845-3).<
把表達(dá)的基因插入到載體的PshAI或者SmaI限制性?xún)?nèi)切酶位點(diǎn)時(shí)，可以通過(guò)EK蛋白酶或者Thrombin蛋白酶將融合表達(dá)的Nus標(biāo)簽完全切除。