凍干，也稱為冷凍干燥。凍干可以保證大分子的穩(wěn)定性。凍干是一種通用的方法，可用于存儲大分子，如蛋白質(zhì)，脂質(zhì)和DNA；微生物如**和酵母等，如果經(jīng)驗足夠豐富，哺乳動物細(xì)胞也可以凍干保存。下面簡要介紹下凍干過程。

為了凍干液體樣品，首先-80℃下冷凍過夜。體積越小，此過程越快，但注意樣品體積應(yīng)不大于容器容量的35％（例如，對于50ml管，*大樣本量為17.5ml）。可以將樣品傾斜成一個角度，以增加表面積。

一旦樣品冷凍，將其置于冰上并迅速覆蓋封口膜，記得在封口膜上戳一些孔。將管放入冷凍瓶中，并將其裝載到凍干機(jī)上。這聽起來很明顯，但確保你知道如何運(yùn)行機(jī)器。特別是關(guān)閉真空，收集樣品時，如果處理不當(dāng)，樣品可能被吸出來。要檢查樣品是否完全凍干，可以取出試管并輕輕搖動。如果有殘留的冰存在，會聽到叮當(dāng)聲。在這種情況下，樣品融化之前，需要將樣品重新放回機(jī)器上。

上述過程適用于可裝配在1.5-50ml管中的樣品。如果你有一個更大的樣品，你可能需要使用殼形冷凍（Shell freezing）。殼形冷凍包括以一定角度旋轉(zhuǎn)含有樣品的燒瓶，同時將其部分浸沒在與干冰混合的甲醇或液氮中。當(dāng)燒瓶旋轉(zhuǎn)時，內(nèi)容物擴(kuò)散到燒瓶的表面上，增加表面積并逐層凍結(jié)。增加表面積增加了冷凍干燥的速度?？赡苓€需要使用冷凍保護(hù)劑，但這又取決于樣品類型了。

Shell freezing的具體內(nèi)容見下圖：

圖片來自：SP Scientific

1. 如果產(chǎn)品在“靜態(tài)”條件下在燒瓶中冷凍，暴露于低壓的表面積*小化，并且冷凍干燥持續(xù)時間延長

2. 當(dāng)在其軸上凍結(jié)時，相同的體積，卻具有暴露于低壓的大得多的表面積，并且增強(qiáng)了凍干速率

3. 較大體積的產(chǎn)品可以通過升高燒瓶高度，旋轉(zhuǎn)凍干。

4. 較小體積的產(chǎn)品，燒瓶可以直接圍繞瓶軸自轉(zhuǎn)。